牛乳中假单胞菌属的PCR快速检测

牛乳中假单胞菌属的PCR快速检测

摘 要：本文主要介绍了牛乳中假单胞菌属的鉴定和PCR快速检测。牛乳在储存过程中，大多数是嗜冷菌，主要是假单胞菌属和一些杆菌属等，会产生耐受巴氏消毒甚至UHT处理的蛋白酶和脂肪酶，分解牛乳中的蛋白质和脂肪。分解产物将导致乳制品风味改变，品质降低，保质期缩短，对产品的形象和消费者的健康都造成了最大的危害。为了探索对这一问题的有效解决方法，本文对低温贮藏原料乳中的嗜冷菌进行了研究。通过生理生化试验，初步确定其所在的菌属，利用通用PCR通用引物，提取假单胞菌属的基因组DNA进行PCR快速检测，最后进行测序比对确定其具体菌属。

关键词：假单胞菌属：生理生化试验：DNA提取；PCR

目  录

中文摘要 I

英文摘要 II

目录 Ⅲ

1 绪论 1

1.1 假单胞菌属简介 1

1.1.1  概念 1

1.1.2  分类 1

1.1.3  分布 2

1.1.4  危害 2

1.2 分子生物学研究进展 3

1.2.1  DNA的提取方法简介 3

1.2.2  PCR方法简介 4

1.3 立题的根据与意义 5

2 实验内容 7

2.1 生理生化实验 7

2.1.1 主要药品试剂 7

2.1.2  主要实验仪器 7

2.1.3 培养基 7

2.1.4 生理生化试验 8

2.2 DNA快速提取 9

2.2.1 主要试剂 9

2.2.2主要实验仪器 9

2.2.3 培养基 9

2.2.4 DNA快速提取方法 9

2.3 牛乳中假单胞菌属的PCR快速检测 11

2.3.1 主要试剂及配置 11

2.3.2 主要实验仪器 11

2.3.3 PCR反应 12

3 实验结果与讨论 14

3.1 生理生化试验结果 14

3.2 提取DNA实验现象 15

3.3 PCR快速检测、DNA回收及测序比对结果 16

3.3.1 电泳结果 16

3.3.2 测序比对 17

3.4 实验结果与分析 20

3.4.1 生理生化试验 20

3.4.2 DNA提取和PCR操作 21

4 总结与展望 22

致谢 23

参考文献 24