灵芝子实体多糖和三萜含量分析评价及原生质体融合的研究

灵芝子实体多糖和三萜含量分析评价及原生质体融合的研究

摘 要：为了选育提取加工专用型灵芝品种，选择灵芝多糖和三萜含量为评价指标，对12个灵芝品种的子实体多糖和三萜含量进行了分析评价。结果表明，不同灵芝菌株的子实体在多糖和三萜含量上存在着一定的差异，其中多糖以薄树灵芝、日本红芝、仙芝、京大、树舌灵芝为高，三萜含量却以京大、赤芝05、惠州、信州、树舌灵芝、松杉灵芝、日本红芝为高，并且二者的含量不存在显著的相关性，这为选择和选育灵芝多糖和灵芝三萜均高的适合精深加工专用的灵芝品种提供了理论依据。采用赤芝05与赤芝06进行原生质体融合共得到187株融合子，其中与双亲都有拮抗反应的融合子有33株，这为选择和选育灵芝多糖和灵芝三萜均高的适合精深加工专用的灵芝品种提供了实验室实验基础。

关键词：食用菌；灵芝；子实体；多糖；三萜；原生质体融合

目  录

中文摘要 I

英文摘要 II

目录 III

1  绪论 1

1.1  灵芝概述及研究概况 1

1.1.1 灵芝多糖研究进展 2

1.1.2 灵芝三萜研究进展 4

1.2  原生质体技术育种 7

1.3 食用菌原生质体研究进展 9

2  实验材料与方法 11

2.1  实验材料 11

2.1.1 供试菌株 11

2.1.2 主要试剂 11

2.1.3 主要仪器 11

2.1.4 培养基 12

2.2  实验方法 12

2.2.1 灵芝栽培培养 12

2.2.2 灵芝多糖含量测定 12

2.2.2.1 标准曲线的绘制 12

2.2.2.2 灵芝子实体中多糖含量的测定 13

2.2.3  灵芝三萜含量测定 13

2.2.3.1 标准曲线的绘制 13

2.2.3.2 灵芝子实体中三萜含量的测定 13

2.2.4  灵芝原生质体融合 14

2.2.4.1 菌丝体的培养 14

2.2.4.2 原生质体制备 14

2.2.4.3 原生质体融合 14

2.2.4.4 再生菌落的检出 14

2.2.4.5 融合子的鉴定 14

3  实验结果与讨论 15

3.1  不同灵芝菌株子实体多糖含量测定结果 15

3.1.1 标准曲线绘制 15

3.1.2 不同灵芝菌株子实体多糖含量比较 16

3.2  不同灵芝菌株子实体三萜含量测定结果 16

3.2.1 标准曲线绘制 17

3.2.2 不同灵芝菌株子实体三萜含量比较 18

3.3  灵芝原生质体融合 18

    3.3.1 再生菌株的检出及形态观察 18

3.3.2 再生菌株与亲本的拮抗 19

3.4  讨论 20

4  总结与展望 22

致谢 24

参考文献 25