磁性纳米固定化蛋白酶研究

磁性纳米固定化蛋白酶研究

摘要：酶具有在温和条件下可以快速催化反应等优点，但是，在在实际应用中，利用游离酶作为催化剂有很多局限性，因此本文主要研究蛋白酶的固定化。首先用磁性纳米材料与3-氨基丙基三乙氧基硅烷相结合，得到的产物再用戊二醛试剂以共价键与蛋白酶相结合，得到磁性纳米固定化蛋白酶。然后用考马斯亮蓝染料结合比色法测定蛋白酶的固载率。

实验结果得到，用磁性纳米铁可以成功的实现蛋白酶的固定化。用磁性纳米氧化铁作为载体，蛋白酶的固载率为40.55％，用磁性纳米四氧化三铁作为载体，蛋白酶的固载率为46.35％。因此，磁性纳米四氧化三铁与蛋白酶的固定化结合较高。

关键词：蛋白酶；磁性纳米铁；固定化

目  录

中文摘要 I

英文摘要 II

目录 III

1. 绪论 1

1.1  生物酶催化 1

1.1.1 生物酶催化的定义 1

1.1.2 酶活性位特点 1

1.1.3生物酶催化对社会的贡献 1

    1.2  固定化酶的性质及其影响因素 1

         1.2.1 影响固定化酶性质因素 2

         1.2.2 固定化后酶性质的变化 2

         1.2.3 评价固定化酶的指标 2

    1.3  酶固定化方法 3

   1.3.1吸附法 3

   1.3.2交联法 3

   1.3.3包埋法 3

   1.3.4共价结合法 4

   1.3.5热处理法 4

   1.3.6结晶法 4

   1.3.7分散法 4

   1.3.8其他方法 5

1.4 固定化酶与游离酶的比较 5

   1.4.1游离酶催化的局限性 5

   1.4.2固定化酶的优势 5

   1.4.3固定化酶的缺点 6

1.5 实验思路   6  

2. 实验部分 7

2.1 实验试剂及配制 7

2.1.1 实验试剂 7

2.1.2 实验试剂的配制 7

2.2 实验仪器 8

2.2 酶的选取 8

2.3 实验步骤 8

  2.4.1 用纳米氧化铁和纳米四氧化三铁固定蛋白酶 8

  2.4.2 磁性纳米固定化蛋白酶的固载率的测定 9

  2.4.3 蛋白质标准曲线的绘制 10

3. 结果与讨论 11

3.1  实验结果 11

3.1.1 标准曲线的绘制 11

3.1.2 磁性纳米固定化蛋白酶的固载率的测定 11

3.2  实验结果分析 13

   3.2.1实验误差分析 13

   3.2.2实验结果涉及的相关知识 13

4．总结与展望 16

致谢 17

参考文献 18