α-淀粉酶固定化的研究

α-淀粉酶固定化的研究

摘 要：酶作为一种生物催化剂,因其具有高选择性、催化反应条件温和、无污染等特点,广泛应用于食品加工、医药和精细化工等行业，随着人类对环保的日益关注,酶的应用会更受关注。但自由酶的稳定性差、易失活、不能重复使用,纯化困难等缺点，使其难以在工业中更为广泛的应用。在此条件下,固定化酶的概念和技术得以提出和发展,此外，如何利用天然高分子载体,对其改性,或利用超临界技术、纳米技术、膜技术等来固定酶,也成为酶工程研究的热点。

用聚苯乙烯阴离子交换树脂作载体，分别采用吸附法和吸附交联法将α—淀粉酶固定化，研究了固定化条件。结果表明，最佳固定化条件为：吸附温度6～9℃，pH值6.8，吸附时间16小时，交联温度6～9℃，交联时间8小时，戊二醛浓度4%。吸附交联法所得固定化α-淀粉酶稳定性较好，克服了传统吸附法的缺点，提高了固定化酶的酸碱稳定性、热稳定性、操作稳定性。

关键词：聚苯乙烯阴离子交换树脂；固定化；α-淀粉酶

目  录

中文摘要 I

英文摘要 II

目录 III

1 绪论 1

1.1固定化酶 1

1.1.1 固定化酶的优点 1

1.1.2 固定化酶的缺点 1

1.1.3固定化酶的发展及现状 1

1.2酶的固定化方法及其优缺点 2

1.2.1包埋法 2

1.2.2吸附法 3

1.2.3共价偶联法 4

1.2.4交联法 4

1.3固定化酶载体的种类 4 

1.4本文研究内容 5

2 实验部分 6

2.1材料 6

2.2方法 6

2.2.1α-淀粉酶的配制 6

2.2.2载体的处理 6

2.2.3固定化方法 6

2.2.4酶活力的测定 6

2.2.4.1试剂 6

2.2.4.2仪器 6

2.2.4.3测定方法 6

2.2.4.4结果计算 7

2.2.5相对酶活力的计算 7

3 结果与讨论 8

3.1吸附法固定化条件的优选 8

3.1.1固定化温度 8

3.1.2固定化pH值 8

3.1.3固定化时间 9

3.2吸附交联法固定化条件的优选 9

3.2.1交联温度 9

3.2.2交联时间 10

3.2.3戊二醛浓度 11

3.3吸附法与吸附交联法的比较 11

3.3.1固定化酶活力 11

3.3.2固定化酶稳定性 12

3.3.3操作稳定性 12

4 总结 13

致谢 14

参考文献 15

附录A 吸光度与测试α-淀粉酶浓度对照表 16