雷帕霉素发酵条件的优化

雷帕霉素发酵条件的优化

摘  要：本文从雷帕霉素的摇瓶发酵着手，对斜面培养基、种子培养基和发酵培养基的组成和浓度进行优化，同时考察了种子菌龄、摇瓶收获时间和HPLC萃取条件。实验主要采用单因素法来比较各因素的影响，以达到优化的目的。雷帕霉素的测定方法有生物活性测定法、薄层层析法和液相色谱法，经过比较得出，高效液相色谱法可以简洁的定量分析雷帕霉素，而且测定结果比较可靠。在对培养基和各种条件进行优化后，雷帕霉素的产量得到了很大的提高，在优化后的条件下雷帕霉素的产量达到140mg/L，为进一步工业化生产雷帕霉素提供了基础。    

关键词：雷帕霉素；免疫抑制剂；高效液相色谱；发酵条件优化

目  录

中文摘要 I

英文摘要 II

目录 III

绪论 1

1.1  前言 1

    1.1.1 雷帕霉素结构性质 1

    1.1.2 雷帕霉素药理学性质 2

1.2  雷帕霉素市场现状 2

实验部分 4

    2.1  实验材料 4

 2.1.1  菌种来源 4

 2.1.2  培养基组成 4

    2.2  仪器设备 4

2.3  实验方法 4

     2.3.1 培养条件 4

     2.3.2 分析方法 4

结果与讨论 7

     3.1  斜面培养基的选择 7

     3.2  种子培养基的选择 8

     3.3  种子菌龄的选择 9

 3.3.1 种子生长曲线 9

 3.3.2 种子菌龄对发酵效价的影响 10

    3.4  发酵培养基的优化 11

 3.4.1 碳源的影响 11

 3.4.2 氮源的影响 12

 3.4.3 前提的影响 13

    3.5  摇瓶收获时间的选择 14

    3.6  HAPL萃取条件优化 14

4．总结与展望 16

致谢 17

参考文献 18