粗毛栓菌木聚糖酶cDNA的RT-PCR扩增

目 录

引言 2

1实验材料与方法 3

1.1菌株及培养方式 3

1.1.1 种子培养.................................................3

1.1.2扩大培养.................................................3

1.2 使用试剂和仪器 3

1.2.1 使用仪器 3

1.2.2 所用试剂 4

1.3 准备实验 4

1.4 总RNA的提取 4

1.5 总RNA纯度与浓度的检测 4

1.5.1  RNA纯度测定 4

1.5.2  RNA浓度测定 5

1.6 总RNA的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳 5

1.7 PCR反应 5

1.7.1 引物设计 5

1.7.2 逆转录 5

1.7.3 木聚糖酶cDNA的PCR扩增及检测 6

1.8   PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳 6

2 结果与分析 6

2.1 总RNA提取后的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳结果 6

2 .2  总RNA浓度及纯度检测 7

2. 3 木聚糖酶cDNA的PCR扩增及检测............................7

3 讨论 7

参考文献 8

致谢 8

     粗毛栓菌木聚糖酶cDNA的RT-PCR           

摘要  本实验以粗毛栓菌作为出发菌，进行了木聚糖酶cDNA的PCR扩增。以木聚糖为碳源，用高碳低氮培养基, 培养7d，收集菌丝体，提取总RNA，做RT-PCR。结果表明，PCR扩增出两条亮度较弱的DNA带。 

关键词 粗毛栓菌，木聚糖酶cDNA，RT-PCR扩增