摘要:本论文研究的是牛初乳中乳铁蛋白的提取。牛初乳是牛3天内产的乳, 是自然界营养最为富集的食品资源之一。牛初乳含有很多活性物质,比如乳铁蛋白。 乳铁蛋白(Lf)的含量在初乳中最为丰富。Lf具有多种生物活性功能,如广谱抗菌活性,增强铁的传递和吸收,免疫调节作用,调节发炎反应,抗病毒作用,可广泛应用于食品,医疗和化妆品领域。但是就我国目前而言其中大部分的营养活性成分并没有得到充分利用而被浪费掉,因此如能加以充分利用将促进生物活性食品生产、具有明显的社会效益和经济效益。本课题通过离子交换层析法从天然产物初乳中纯化出乳铁蛋白。并考虑流速,柱高,进样浓度对收率的影响;用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联免疫法和高效液相测纯度。
关键词:牛初乳;乳铁蛋白;电泳;酶联免疫法;提取
目 录
中文摘要……………………………………………………………………..I
英文摘要…………………………………………………………………….II
目录………………………………………………………….…………….III
目录………………………………………………………………………….IV
1. 绪论……………………………………………………………………….1
1.1 牛初乳的生理功能和营养特征……………………………………..1
1.1.1 牛初乳的主要功能组份………………………………………..1
1.1.2 资源利用状况…………………………………………………..1
1.2 乳铁蛋白……………………………………………………………..2
1.2.1 乳铁蛋白的性质与结构………………………………………..2
1.2.2 乳铁蛋白的生理功能与作用机制………………………………3
1.3 乳铁蛋白的分离方法…………………………………………………5
1.3.1 色谱法……………………………………………………………5
1.3.2 超滤法……………………………………………………………7
1.4 乳铁蛋白的检测方法…………………………………………………7
1.4.1 HPLC法测定牛初乳中乳铁蛋白的总合量………………………7
1.4.2 SDS-PAGE凝胶电泳测定乳铁蛋白纯度……………………….7
1.4.3 酶联免疫吸附测定乳铁蛋白的总合量…………………………8
2.实验部分.………………………………………………………………….9
2.1 树脂的选择……………………………………………………………9
2.1.1 静态法选用树脂…………………………………………………9
2.1.2 动态吸附选用树脂………………………………………………11
2.2 流速对离子交换吸附的影响…………………………………………11
2.2.1 实验仪器与药品…………………………………………………11
2.2.2 实验方法和步骤………………………………………………..11
2.3 填料高度对离子交换吸附的影响…………………………………..12
2.3.1 实验仪器和药品………………………………………………..12
2.3.2 方法……………………………………………………………..12
2.4SDS-PAGE凝胶电泳测定乳铁蛋白纯度……………………………..13
2.4.1 实验仪器和试剂……………………………………………….13
2.4.2 步骤…………………………………………………………….13
3. 结果与讨论……………………………………………………………..15
3.1 树脂的选择结果与讨论…………………………………………………..15
3.2流速对离子交换吸附的影响结果与讨论………………………….15
3.3填料高度对离子交换吸附的影响结果和讨论…………………….15
4.总结与展望……………………………………………………………..17
4.1 实验总结…………………………………………………………….17
4.2 展望………………………………………………………………….17
致谢………………………………………………………………………….18
参考文献…………………………………………………………………….19