枯草芽孢杆菌芽孢形成培养条件优化

枯草芽孢杆菌芽孢形成培养条件优化

摘 要：如果无菌灌装设备灭菌效果差，饮料在无菌灌装过程中，可能会有微生物的滋生，影响产品的品质。因此无菌灌装设备在出厂前，一般需要无菌验证。枯草芽孢杆菌是一种不易被杀死的细菌，常用作测试菌。本论文对枯草芽孢杆菌芽孢形成的培养基成分和培养条件进行优化，为之后无菌灌装的安全性评价做了前期准备。此次试验通过单因素试验，优化出ATCC9372菌株最适宜的发酵培养基组成和培养条件。结果表明枯草芽孢杆菌的最佳培养基配方为：淀粉5g/L,牛肉膏5g/L ,NaCl 3g/L,K2HPO4 3g/L,MnSO4.H2O 2.4mmol。并将培养基pH调至7.0，在250mL三角瓶分装培养基25mL，在37℃下以150r/min 速度摇瓶培养24h。在此培养条件下，枯草芽孢杆菌ATCC9372菌株的活菌数、芽孢数和芽孢率均能达到最高。本实验还通过采用平板计数法和浊度法研究了枯草芽孢杆菌ATCC9372菌株的生长曲线，结果表明其最佳接种龄为6小时。

关键词：枯草芽孢杆菌；芽孢形成；培养基；培养条件

目  录

中文摘要 I

英文摘要 II

目录 III

1. 绪论 1

1.1  研究目的 1

1.2研究概况 1

2. 实验部分 2

2.1实验材料、仪器与方法 2

2.1.1 材料 2

2.1.2 仪器 2

         2.1.3 方法 3

               2.1.3.1斜面接种法 3

               2.1.3.2液体种子培养 3

               2.1.3.3液体发酵培养 3

               2.1.3.4测定方法:计数采用平板计数法和浊度法 3

               2.1.3.5芽孢的测定方法 4

               2.1.3.6发酵培养基的优化 4

               2.1.3.7 发酵条件的优化 4

3. 结果与讨论 4

3.1培养基成分优化   4

3.1.1碳源对芽孢形成的影响   4

3.1.2 氮源对芽孢形成的影响 5

3.1.3 无机盐对芽孢形成的影响 6  

         3.1.4 Mn2+浓度对芽孢形成的影响 7

3.2培养条件的优化 8

         3.2.1初始pH对芽孢形成的影响 8

         3.2.2 培养温度对芽孢形成的影响 9

         3.2.3 装液量对芽孢形成的影响 10

         3.2.4 摇瓶速度对芽孢形成的影响 11

3.3 枯草芽孢杆菌生长曲线的研究 12

4．总结与展望 14

4.1 总结 14

4.2 展望 14

致谢 15

参考文献 16