酿酒酵母S02原生质体的形成研究
摘 要：原生质体是指微生物在一定酶的作用下，脱去细胞壁后所剩余的那部分结构，由于原生质体失去细胞壁的屏蔽而成球形，只能在高渗透压培养基中存活，并在合适的培养基中恢复细胞壁而再生。对环境、诱变剂等更为敏感，是诱变育种、细胞融合等常用材料。本实验初步研究了菌龄、不同配比的酶解液及浓度、酶解时间、温度、pH、渗稳剂种类及浓度等因素对酿酒酵母S02(Saccharomyces cerevisiae S02) 原生质体的形成率的影响,结果表明:在液体YEPD培养基下培养24h，采用pH6.0的1.5%的混合酶(蜗牛酶:纤维素酶=1:1);在30oC酶解3.5h;用0.7mo1/L的蔗糖为渗透压稳定剂时,原生质体形成率达到最高，为92.21%。
关键词：酿酒酵母S02；原生质体形成; 形成条件
目 录
中文摘要 Ⅰ
英文摘要 Ⅱ
目录 Ⅲ
1. 绪论 1
1.1 酿酒酵母S02原生质体制备的意义 1
1.1.1 制备原生质体的原由 1
1.1.3 原生质体融合的优越性 1
1.2 酵母菌类属 2
1.3 人类对原生质体的了解 4
1.4 酵母菌细胞壁的组成 3
1.5 人类对酵母菌的应用 4
2. 实验部分 6
2.1 材料 6
2.1.1 菌种 6
2.1.2 主要试剂 6
2.1.3 主要仪器 6
2.1.4 培养基 7
2.2 方法 7
2.2.1 原生质体的制备 7
2.2.1.1 菌体培养方法 7
2.2.1.2 原生质体的形成 7
2.2.1.3 原生质体形成率的方法 7
2.2.2 各个单因素对原生质体形成率的影响 8
2.2.2.1 酶解时pH值对原生质体形成率的影响 8
2.2.2.2 酶解温度对原生质体形成率的影响 8
2.2.2.3 酵母菌菌龄对原生质体形成率的影响 8
2.2.2.4 混合酶中酶的相互比例对原生质体形成率的影响 8
2.2.2.5 酶解时间对原生质体形成率的影响 9
2.2.2.6 酶解液浓度对原生质体形成率的影响 9
2.2.2.7 渗透压稳定剂浓度对原生质体形成率的影响 9
2.2.2.8 渗透压稳定剂种类对原生质体形成率的影响 9
2.2.2.9 酿酒酵母S02原生质体形态观察 9
3. 结果与讨论 10
3.1 各个单因素对原生质体形成率的影响 10
3.1.1 酶解时pH值对原生质体形成率的影响 10
3.1.2 酶解温度对原生质体形成率的影响 11
3.1.3 酵母菌菌龄对原生质体形成率的影响 12
3.1.4 混合酶中酶的相互比例对原生质体形成率的影响 13
3.1.5 酶解时间对原生质体形成率的影响 14
3.1.6 酶解液浓度对原生质体形成率的影响 15
3.1.7 渗透压稳定剂浓度对原生质体形成率的影响 16
3.1.8 渗透压稳定剂种类对原生质体形成率的影响 17
3.1.9 酿酒酵母S02原生质体形态观察 18
3.2 本章小结 20
4.结论与展望 21
致谢 24
参考文献 25
附录 26
