雷帕霉素高产菌的培养基优化
摘要：雷帕霉素是从亲水链霉菌中分离的一种大环内酯类抗生素，是一种有效的抗真菌剂，也是一种很好的免疫抑制剂同时具有抗肿瘤作用。本文首先将实验室保藏的雷帕霉素高产菌进行活化，根据生产雷帕霉素菌种的生长特性，对发酵培养基进行系统的优化。先通过种子瓶培养，然后到发酵瓶培养，在一组发酵培养基分别中加入不同浓度的某一物质，最终通过生物价效检测法或高效液相法测量雷帕霉素的产量。经过培养基优化后，该最优培养基组成为（％）：葡萄糖4，甘油1，黄豆饼粉2，豆油2，KH2PO4 0.5，K2HPO4 0.5，NaCl 0.5，MgSO4 0.2，FeSO4 0.15，L-Lysine 0.1。雷帕霉素的产量比初始培养基中的产量提高了47%。
关键词：雷帕霉素；发酵；优化
目 录
中文摘要.....................................................................I
英文摘要....................................................................II
目录.......................................................................III
1 绪论......................................................................1
1.1 免疫抑制剂与雷帕霉素...................................................1
1.2 雷帕霉素的理化性质.....................................................1
1.3 雷帕霉素药理学性质.....................................................2
1.3.1 RPM抗移植物排斥作用................................................2
1.3.2 RPM的免疫抑制机理..................................................2
1.4 雷帕霉素的分析方法.....................................................3
1.4.1 细胞破碎的方法....................................................3
1.4.2 生物活性测定法....................................................3
1.4.3 高效液相色谱法（HPLC）...........................................3
1.5 培养基优化.............................................................3
1.5.1 葡萄糖和甘油对雷帕霉素发酵水平的影响..............................3
1.5.2 黄豆饼粉对雷帕霉素发酵水平的影响..................................4
1.5.3 豆油对雷帕霉素发酵水平的影响......................................4
1.5.4 培养基中L-赖氨酸对雷帕霉素发酵水平影响...........................5
1.5.5 培养基中不同无机盐浓度对雷帕霉素发酵水平的影响....................5
1.5.5.1 培养基中NaCl含量对雷帕霉素产量的影响........................5
1.5.5.2 培养基中磷酸钾盐含量对雷帕霉素产量的影响.....................5
1.5.5.2 培养基中Mg2+含量对雷帕霉素产量的影响........................5
1.5.5.2 培养基中Fe2+含量对雷帕霉素产量的影响.........................6
1.5.6 L-甲硫氨酸对雷帕霉素发酵水平的影响................................6
1.6 市场前景..............................................................6
2 实验部分 ..............................................................7
2.1 实验材料...............................................................7
2.1.1 菌株..............................................................7
2.1.2 培养基 ...........................................................7
2.1.3 实验仪器..........................................................7
2.2 实验方法...............................................................7
2.2.1 菌株的活化方法....................................................7
2.2.2 种子瓶培养条件....................................................7
2.2.3 发酵瓶培养条件....................................................8
2.2.4 培养基优化方法....................................................8
2.2.4.1 生物效价测定方法.............................................8
2.2.4.2 HPLC测定产量方法...........................................9
3 结果与讨论...............................................................10
3.1 培养基中葡萄糖含量对雷帕霉素产量的影响 ..............................10
3.2 培养基中甘油含量对雷帕霉素产量的影响..................................11
3.3 黄豆饼粉对雷帕霉素发酵水平的影响......................................12
3.4 豆油对雷帕霉素发酵水平的影响..........................................12
3.5 L-赖氨酸对雷帕霉素发酵水平的影响.....................................14
3.6 培养基中NaCl含量对雷帕霉素产量的影响.................................14
3.7 培养基中磷酸钾盐含量对雷帕霉素产量的影响..............................15
3.8 培养基中Mg2+含量对产量的影响.........................................16
3.9 培养基中Fe2+含量对产量的影响 ........................................16
3.10 培养基中L-Met含量对产量的影响.......................................17
4 总结与展望...............................................................18
致谢.......................................................................19
参考文献...................................................................20
