疣粒野生稻来源地抗水稻白叶枯病单染色体片段渗透系的筛选
摘要:疣粒野生稻对水稻白叶枯病高抗,通过体细胞杂交将其抗性导入高产栽培稻大粒香中。经QTL定位,将高抗的杂交后代的抗性位点定位到1,3,5号三条染色体上,为了对这些抗性位点精细定位并克隆抗病基因,经多代回交构建了抗病杂交后代与感病亲本的高代回交群体,利用这些群体结合QTL连锁的分子标记进行包含抗性位点的单染色体片段渗透系的筛选,为抗性QTL位点的精细定位及基因克隆奠定基础。本实验就是对杂交群体中1号染色体上包含抗性QTL位点在内的单染色体片段渗透系的筛选。先通过电泳消除495个个体中3号及5号染色体上的抗性影响,使其拥有纯合的感病基因,继而对1号上的抗性位点进行研究,筛选包含抗性QTL位点在内的单染色体片段渗透系。
关键词:水稻;单染色体片段;白叶枯病
目 录
摘要 I
Abstract. II
目 录 III
1.绪论 1
1.1 水稻白叶枯病的致病及其抗病机理 1
1.2 水稻白叶枯病的病理基础知识及其对水稻的危害 2
1.2.1水稻白叶枯病的发病症状 2
1.3 水稻抗白叶枯病研究进展 3
1.4 分子标记的研究 4
1.4.1 SSR技术的特点 5
1.4.2 STS标记(sequence tagged site,SSR序标位) 6
1.4.3 SSR标记(simple sequence repeats,SSR 简单重复序列) 6
1.4.4 SSR 标记技术的基本原理 6
1.4.5 SSR及STS 标记技术程序 7
2.实验内容 7
2.1实验材料和方法 7
2.1.1 实验材料 8
2.1.1.1 水稻材料......................................... 8
2.1.1.2 供试试剂(TPS简易法提取水稻DNA)................. 8
2.1.1.3 PCR反应体系试剂 ................................. 8
2.1.1.4 制胶、电泳及染色、显色试剂....................... 8
2.1.2 水稻DNA的提取 9
2.1.3 制胶、电泳及检测 9
2.1.4 DNA片段的PCR扩增 10
2.1.4.1 STS程序扩增及显影.............................. 10
2.1.4.2 SSR程序扩增及显影.............................. 11
3.结果与讨论 11
3.1 亲本电泳对照图 12
3.2 讨论 14
4.总结与展望 14
致谢 16
参考文献 17
附录 19