羊肚菌深层发酵和多糖提取分析

羊肚菌深层发酵和多糖的提取分析

摘要：羊肚菌是一种十分重要的食药兼用真菌，含有丰富的生理活性物质，多糖是其中的重要一种，具有增强肌体免疫力、抗疲劳、抗病毒、抑制肿瘤等多种功能。本实验羊肚菌液体发酵最适发酵温度为25℃，最适的转速为150rpm；溶解氧会抑制菌丝体的生物量和多糖和积累；分离菌丝体和发酵液，然后采用超声破壁，1:40的浸提比浸提3h，浸提次数为两次，用95%的乙醇醇析2d，再用无水乙醇洗涤两次、Sevage法脱蛋白后用ΦMW3500 透析制取胞内和胞外多糖；采用苯酚-硫酸法测定胞内多糖的总糖，最高的得率有3.5%；液相分析结果表明，胞内还有游离的单糖，胞外则不含游离的单糖；用2mol/L的硫酸水解后的多糖进行液相分析，结果表明，羊肚菌多糖可能有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖。

关键字：羊肚菌；发酵；多糖；单糖；液相色谱法

目录

中文摘要 Ⅰ

英文摘要 Ⅱ

1.绪论 1

1.1羊肚菌概述 1

1.1.1羊肚菌简介 1

1.1.2羊肚菌的药用价值 1

1.1.3羊肚菌的深层发酵 1

1.2多糖的分离方法简介 2

1.2.1菌丝体破壁和浸提 3

1.2.2溶液脱色 3

1.2.3溶液脱蛋白 3

1.2.4多糖的初步纯化 4

1.2.5多糖的提取 4

1.3 多糖的测定 4

1.3.1总糖含量的测定 4

1.3.2多糖中单糖的测定 5

1.4 羊肚菌发酵的影响因素 5

1.4.1温度对菌丝体生物量的影响 5

1.4.2转数对生物量的影响 5

1.4.3溶解氧对多糖产量的影响 5

1.4.4菌丝体生物量的测定 5

1.5研究现状分析与项目意义 6

1.5.1研究现状分析 6

1.5.2项目的研究意义 6

2．实验部分 7

2.1  实验材料 7

2.1.1 实验菌种 7

2.1.2 实验试剂 7

2.1.3主要仪器设备 7

2.2  实验方法 8

2.2.1 实验主要技术路线 8

2.2.2 实验主要内容 10

3.结果与讨论 13

3.1葡萄糖标准曲线 13

3.2发酵条件的确定 13

3.2.1发酵温度的确定 13

3.2.2转数的确定 14

3.2.3溶解氧对多糖的影响 14

3.3氨基酸的检测 15

3.4单糖的检测 16

3.4.1标准品的液相图 16

3.4.2粗多糖的液相分析 18

3.4.3硫酸水解后的错多糖的液相分析 19

4.总结与展望 21

4.1实验总结 21

4.2展望 22

4.2.1发酵条件的控制和菌丝球的形成 22

4.2.2胞内和胞外多糖的分离 22

4.2.3多糖的纯化和单糖的分离 22

4.2.4单糖的检测 22

4.2.5羊肚菌液体发酵前景 22

致  谢 23

参考文献 24