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猪血中提取CuZn-SOD

猪血中提取CuZn-SOD
上传会员: aesxtepe
提交日期: 2013-07-30 20:03:32
文档分类: 生物工程
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文档字数:
文档字数:12803
猪血中提取Cu/Zn-SOD
摘   要:超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是生物体内重要的超氧阴离子自由基清除剂,能催化生物体内超氧自由基(O2-)发生歧化反应,对机体细胞起保护作用,己成为化学及生物化学研究领域中热门的研究课题。本文对猪血中提取Cu/Zn-SOD的工艺条件进行了研究,首先在实验室条件下从猪血中提取Cu/Zn-SOD,并对其离心条件,乙醇-氯仿处理后的混合液的处理,丙酮沉淀等提取条件进行了优化。对实验室条件下所得的工艺条件进行了初步放大实验,工艺放大流程及实验结果为:1000ml猪血经过血液预处理,溶血,乙醇-氯仿混合液除去血红蛋白,丙酮分级沉淀,60-65℃热变性及丙酮二次沉淀得到粗Cu/Zn-SOD酶液。再将粗酶液上阴离子DEAE-Sepharose Fast Flow交换层析柱,冻干,最终获得了比活力为5660.79U/mg的精品Cu/Zn-SOD酶23.96mg。
关键词:猪血;铜锌超氧化物歧化酶;提取;优化


目  录
中文摘要 I
英文摘要 II
目录 III
1 绪论 1
2 实验部分 3
2.1 实验材料与试剂 3
2.2 实验仪器设备 3
2.3 实验步骤 4
2.3.1 实验室制备方法 4
2.3.2 工艺放大流程步骤 5
2.4 Cu/Zn-SOD酶活的测定 6
2.4.1 原理 7
2.4.2 测定步骤 7
2.4.3 计算公式 7
2.5 Cu/Zn-SOD蛋白浓度的测定 7
2.5.1 原理 8
2.5.2 测定步骤 8
3 结果与讨论 9
3.1 实验室制备条件的研究 9
3.1.1 设计实验方法的原理和实验过程中的注意点 9
3.1.2 实验数据处理 10
3.1.3实验结果 12
3.2 工艺放大条件优化及其制备 13
3.2.1 工艺放大流程的优化 13
3.2.2 实验数据处理 17
3.2.3实验结果 18
4 总结与展望 20
4.1 总结 20
4.2 展望 21
致谢 22
参考文献 23

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