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文档题目: |
猪血中提取CuZn-SOD |
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上传会员: |
aesxtepe |
提交日期: |
2013-07-30 20:03:32 |
文档分类: |
生物工程 |
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猪血中提取CuZn-SOD (需要:50 积分) 如何获取积分? |
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文档字数: |
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文档字数:12803 猪血中提取Cu/Zn-SOD 摘 要:超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是生物体内重要的超氧阴离子自由基清除剂,能催化生物体内超氧自由基(O2-)发生歧化反应,对机体细胞起保护作用,己成为化学及生物化学研究领域中热门的研究课题。本文对猪血中提取Cu/Zn-SOD的工艺条件进行了研究,首先在实验室条件下从猪血中提取Cu/Zn-SOD,并对其离心条件,乙醇-氯仿处理后的混合液的处理,丙酮沉淀等提取条件进行了优化。对实验室条件下所得的工艺条件进行了初步放大实验,工艺放大流程及实验结果为:1000ml猪血经过血液预处理,溶血,乙醇-氯仿混合液除去血红蛋白,丙酮分级沉淀,60-65℃热变性及丙酮二次沉淀得到粗Cu/Zn-SOD酶液。再将粗酶液上阴离子DEAE-Sepharose Fast Flow交换层析柱,冻干,最终获得了比活力为5660.79U/mg的精品Cu/Zn-SOD酶23.96mg。 关键词:猪血;铜锌超氧化物歧化酶;提取;优化
目 录 中文摘要 I 英文摘要 II 目录 III 1 绪论 1 2 实验部分 3 2.1 实验材料与试剂 3 2.2 实验仪器设备 3 2.3 实验步骤 4 2.3.1 实验室制备方法 4 2.3.2 工艺放大流程步骤 5 2.4 Cu/Zn-SOD酶活的测定 6 2.4.1 原理 7 2.4.2 测定步骤 7 2.4.3 计算公式 7 2.5 Cu/Zn-SOD蛋白浓度的测定 7 2.5.1 原理 8 2.5.2 测定步骤 8 3 结果与讨论 9 3.1 实验室制备条件的研究 9 3.1.1 设计实验方法的原理和实验过程中的注意点 9 3.1.2 实验数据处理 10 3.1.3实验结果 12 3.2 工艺放大条件优化及其制备 13 3.2.1 工艺放大流程的优化 13 3.2.2 实验数据处理 17 3.2.3实验结果 18 4 总结与展望 20 4.1 总结 20 4.2 展望 21 致谢 22 参考文献 23
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