贻贝酶解肽的抗氧化活性研究

贻贝酶解肽的抗氧化活性研究

摘 要：本论文以贻贝为原料，它是重要的世界性养殖品种，以紫贻贝产量占有最大，并以新鲜贻贝为主要销售形式，经济效益低。贻贝不但作为传统的滋补食品，且具有较高的营养价值和多种药理功效。文献报道，贻贝及其提取物具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤、降血脂等功能活性。其中，多糖是紫贻贝中的主要活性成分之一，目前对其研究主要集中在紫贻贝粗多糖上，而对紫贻贝多糖组分的提取、分离纯化及结构功能研究报道较少。因此，开发利用紫贻贝多糖具有理论价值和实际意义。本课题以嵊泗枸杞所产紫贻贝为试验材料，研究了紫贻贝多糖的提取、脱蛋白、分离纯化、结构鉴定及其免疫抗肿瘤活性。为了鉴定世界食品产品中受到很高评价的海洋生物的抗氧化性，采用酶解方法制备具有显著抗氧化作用的活性肽。主要研究结果如下：在DPPH自由基体系、还原力体系、羟基自由基体系及超氧自由基体系中，随着样品浓度的增加，贻贝酶解物的抗氧化活性增强。

关键词：贻贝；DPPH· ；抗氧化；还原力；超氧；

目  录

中文摘要 I

英文摘要 II

目录 IV

1. 绪论 1

1.1 自由基代谢理论 1

1.2 自由基对生物机体的损伤及机制 1

   1.2.1自由基对脂质的损伤 1

   1.2.2 自由基对蛋白质的损伤 2

   1.2.3 自由基对糖类的损伤 2

1.3 自由基的清除及防御措施 3

1.4 抗氧化剂概述 4

1.5 体外评价抗氧化的方法 5

   1.5.1 DPPH自由基体系 5

1.5.2 还原能力的测定体系 5

1.5.3 羟自由基体系 5

1.5.4 邻苯三酚体系 6

1.6 实验背景 6

2. 实验部分 6

2.1 实验材料 6

2.2 实验试剂 7

2.3 实验仪器 7

2.4 实验方法 7

2.4.1 贻贝粗蛋白的制备 7

2.4.2基本成分测定 8

2.4.3 水解度(DH)的测定 8

2.4.4蛋白回收率的测定 8

2.4.5 贻贝粗蛋白酶解物的制备 8

2.4.5.1 整体流程 8

2.4.5.2 不同蛋白酶水解贻贝粗蛋白 8

2.4.5.3酶解物的抗氧化活性评价 8

2.4.6 酶解物对DPPH 自由基的测定 9

2.4.7 酶解物对还原力的测定 9

2.4.8 酶解物对羟基自由基的测定 9

2.4.9 酶解物对超氧自由基的测定 10

3 结果与讨论 10

3.1 基本成分分析 10

3.2 不同蛋白酶对贻贝粗蛋白的水解效果的比较 10

3.3 DPPH自由基体系 11

3.4 还原力的测定 12

3.5 羟基自由基体系 13

3.6 超氧自由基体系 14

4 结 论 15

4.1 实验结论 15

4.2 实验条件讨论 16

   4.2.1贻贝酶解物对羟基自由实验条件的摸索 16

   4.2.2贻贝酶解物对超氧自由实验条件的摸索 16

致    谢 17

参考文献 18