摘要
目的：研究依诺肝素钠抗FXa效价测定的方法。
方法：生色底物法。
结果：该方法日内、日间RSD分别为0.44%、1.75%。
结论：是测定依诺肝素钠效价的可行方法
关键词 依诺肝素钠；FXa效价 ；特异性反应
依诺肝素钠（Enoxaparin Sodium）[1]粘膜得到的肝素钠的苄酯衍生物经碱裂解而得的低分子量肝素钠盐，是低分子量肝素钠的一种。其英文名为 Enoxaparin Sodium，别名为Lovenox。它是由肝素钠经过酯化和裂解后生成的一种低分子量肝素钠，它含有大量未定性的低聚糖。它的特点是在大部分低聚糖糖链的非还原末端具有一个 4-依诺吡喃糖醛酸这一结构，其中 15~25%的组分在糖链的还原末端具有 1,6-脱水结构。它的重均分子量介于 3,800~5,000 D 之间，特征值约为 4,500 D，相对分子量小于 2,000 D 的低聚糖含量在 12.0~20.0%之间，分子量介于 2,000~8,000 D 的低聚糖含量在 68.0~82.0%之间，相对分子质量高于 8,000D 的含量不得超过 18.0%。以干重计算，每毫克依诺肝素的抗 Xa 因子效价在 90~125IU 之间，抗 IIa 因子效价在 20~35IU之间，抗 Xa 因子效价与抗 IIa 因子效价的比值介于 3.3~5.3 之间。[2]与低分子量肝素（Low molecular weight heparin, LMWH）[3]相比，其抗Xa因子活性更强，对活化部分凝血活酶时间（APTT）的影响小，故抗血栓作用强而对凝血机制的影响小，极少增加出血倾向，已广泛用于预防深静脉血栓、治疗血栓形成和血液透析抗凝。现行中国药典[4]收载的为肝素生物测定法,由于新鲜兔血采集较为困难,实验受人为影响因素多,因此重现性较差。国内曾有采用绵羊血浆、山羊血浆测定肝素钠的报道。
本文参照BP(2003版)[5],对多批依诺肝素钠原料的抗FXa｛6｝和抗FⅡa的活性及其比率进行了测定并探讨了该方法的实际应用价值，为该品种质量控制积累了部分实验数据。
1 仪器和试剂
1.1仪器
岛津UV-2101PC紫外分光光度计、TB-85岛津37度恒温水浴。
1.2试剂
氯化钠、冰醋酸、三羟甲基氨基甲烷为分析纯；牛血清白蛋白购自SIGMA公司； STACHROM HEPARIN试剂盒购自STAGO公司；效价标准品来自欧洲药典委员会；依诺肝素钠来自杭州九源基因工程有限公司。
1.1.3 三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液（pH7.4）
2方法
2.1实验原理
