摘要
S-腺苷甲硫氨酸(SAMe)是甲硫氨酸和三磷酸腺苷相结合的产物,广泛存在于动植物和微生物体内,参与40多种生化反应,主要作为三种代谢途径(转甲基、转硫基、转氨丙基)的前体。S-腺苷-L-蛋氨酸(SAMe)是目前效果最显著、功能最完善、适用面最广泛的一种新型药物。它既可作为疾病治疗药物,又可作为食品营养强化剂物质,是甲硫氨基酸-蛋氨酸的天然代谢产物,协助人体内重要功能的正常运行,是无毒、抗衰老的健康产物,具有治疗各种高发难治疾病(关节炎、抑郁症、肝病等)的功能。SAMe制备方法主要有化学合成法、酶促转化法和微生物发酵法。本文利用酵母菌发酵富集S-腺苷甲硫氨酸,并对其进行分离纯化,最终以对甲苯磺酸硫酸盐形式成盐。
关键词 S-腺苷甲硫氨酸、酵母菌、发酵、HPLC、S-腺苷甲硫氨酸对甲苯磺酸硫酸盐
目录
摘要……………………………………………………………………I
第1章文献综述………………………………………………………1
1.1S-腺苷-L-蛋氨酸理化性质与代谢途径…………………………………1
1.1.1理化性质……………………………………………………………1
1.1.2代谢途径……………………………………………………………1
1.2S-腺苷-L-蛋氨酸的临床应用…………………………………………2
1.2.1保护肝脏……………………………………………………………2
1.2.2改善关节炎………………………………………………………2
1.2.3改善情绪……………………………………………………………2
1.2.4改善睡眠……………………………………………………………3
1.3S-腺苷-L-蛋氨酸的制备方法…………………………………………3
1.3.1化学合成法…………………………………………………………3
1.3.2酶促转化法…………………………………………………………3
1.3.3微生物发酵法………………………………………………………3
第2章实验器材与检测方法……………………………………………4
2.1实验器材…………………………………………………………………4
2.2检测方法…………………………………………………………………4
2.2.1种子液、发酵液OD测定………………………………………………………4
2.2.2发酵液中葡萄糖浓度的测定………………………………………4
2.2.3发酵液SAMe+含量测定……………………………………………5
2.2.4破胞液、纳滤液、浓缩液等中SAMe+含量测定……………………5
2.2.5成品HPLC分析……………………………………………………6
2.2.6离子色谱测定浓缩液中硫酸根含量…………………………………6
2.2.7水分分析…………………………………………………………7
第3章实验部分………………………………………………………8
3.1工艺流程…………………………………………………………………8
3.2工艺过程…………………………………………………………………8
3.2.1摇瓶种子的制备……………………………………………………8
3.2.2一级种子液的制备…………………………………………………8
3.2.3二级种子液的制备…………………………………………………9
3.2.4发酵液的制备……………………………………………………………9
3.2.5破胞液的制备………………………………………………………10
3.2.6离子交换……………………………………………………………10
3.2.7脱色………………………………………………………………10
3.2.8纳滤浓缩……………………………………………………………10
3.2.9喷雾干燥……………………………………………………………10
3.2.10真空干燥……………………………………………………………11
第4章实验数据……………………………………………………………13
4.1发酵液检测数据…………………………………………………………13
4.2破胞液HPLC图谱…………………………………………………………13
4.3浓缩液HPLC图谱…………………………………………………………14
4.4喷雾前料液HPLC图谱……………………………………………………14
4.5成品HPLC图谱………………………………………………………………14
4.6离子色谱检测硫酸根图谱………………………………………………15
第5章结果与讨论…………………………………………………16
参考文献……………………………………………………………17
致谢…………………………………………………………………18