高温菜籽粕发酵产灵菌红素的工艺优化

摘要

灵菌红素类化合物是由一类革兰氏阴细菌和革兰氏阳细菌产生的具有生物活性的次生代谢产物。其分子结构都具有一个三吡咯环母核，具有良好的抗肿瘤及免疫抑制活性。本实验是从臭鲑鱼胃中筛选得到一株产红色素的粘质沙雷氏菌，菌株发酵液经酸性甲醇萃取、浓缩、硅胶柱层析等分离纯化后，得到灵菌红素纯品。通过响应面实验，考察了培养基组成和发酵条件对粘质沙雷氏菌产灵菌红素的影响。结果表明，粘质沙雷氏菌最优培养基和发酵条件为：玉米粉10g/L、菜籽粕 21.7g/L、硫酸锌0.05gl/L，发酵液初始pH5.8，接种量为5.5%，装液量80mL/250mL三角瓶，在温度为27℃，200r/min培养24h时，发酵液中灵菌红素的含量达到11.56g/L。研究结果得到了粘质沙雷氏菌高效表达灵菌红素的培养条件，为灵菌红素的工业化生产提供参考。

关键词　粘氏沙雷氏菌；灵菌红素；响应面

目录

摘要 I

第1章 引言 1

第2章 高温菜籽粕发酵生产灵菌红素的研究 3

2.1 材料、试剂与仪器 3

2.1.1 实验材料 3

2.1.2 实验试剂 3

2.1.3 实验仪器 3

2.2 实验方法 4

2.2.1 菜籽粕组分测定 4

2.2.2 粘质沙雷氏菌生长曲线的绘制 6

2.2.3 灵菌红素标准曲线 6

2.2.4 培养基组分 6

2.2.5 单因素试验 6

2.2.6 Plackett-Burman试验(以下简称PB试验) 6

2.2.7 响应面分析 6

2.2.8 灵菌红素的分离纯化 7

2.2.9 灵菌红素的检测方法 7

第3章 实验结果与分析 8

3.1 菜籽粕的基本成分 8

3.2 粘质沙雷氏菌的生长曲线 8

3.3 灵菌红素的标准曲线 8

3.4 影响灵菌红素发酵产量的单因素实验结果 9

3.4.1 发酵时间对灵菌红素产量的影响 9

3.4.2 碳源对灵菌红素产量的影响 10

3.4.3 碳氮比对灵菌红素产量的影响 10

3.4.4 不同无机盐离子对灵菌红素产量的影响 11

3.4.5 Zn2+浓度对灵菌红素产量的影响 11

3.4.6 发酵温度对灵菌红素产量的影响 12

3.4.7 摇床转速对灵菌红素产量的影响 12

3.4.8 接种量对灵菌红素产量的影响 13

3.4.9 装液量对灵菌红素产量的影响 13

3.4.10 pH对灵菌红素产量的影响 14

3.5 影响灵菌红素发酵产量的PB试验结果 15

3.6 影响灵菌红素发酵产量的响应面试验结果 16

第4章 结论 20

参考文献 21