地龙多肽的分离提取

摘要

地龙(Geosaurus)，又名蚯蚓，属环节动物门寡毛纲类，在我国是一种非常传统的动物类中药材。现代研究表明, 地龙有活血化瘀、 溶栓降压、 抗肿瘤、 平喘止咳、 消炎止痛等作用。地龙多肽是地龙体内小分子多肽的总称，种类繁多，其中天然多肽具有抗肿瘤作用，水解产生的多肽能促进动物的生产性能和免疫能力。本实验的目的是探索并优化一种地龙多肽的分离与提取方法，并使工艺更适合大批量的生产。

传统的地龙多肽的提取方法有浸泡煎煮法、回流法等。这些方法有着提取时间长，提取率低的缺点，获得的多肽含量低并且不适用于大规模的生产。因此，在本实验中，综合应用了闪提、超声与酶解等工艺手段，缩短了提取时间并提高了提取效率，再与一些纯化处理过程互相配合，提取出了天然多肽和水解多肽。本实验通过单因素实验与正交试验设计，对影响水解多肽含量的一些因素，包括固液比，加酶量和搅拌时间进行了优化。

本实验所得的最佳酶解条件是：固液比1:4、加酶量1.5%、搅拌时间2.5小时，得到的多肽占总蛋白百分比为23.22%。

关键词：地龙，多肽，提取工艺，天然多肽，水解多肽

目录

1绪论 1

1.1课题背景及目的 1

1.1.1地龙 1

1.1.2地龙多肽 2

1.1.3地龙有效成分的分离提取方法 4

1.2 国内外研究现状 5

1.3 研究内容及方法 6

2 实验材料与方法 7

2.1 实验材料 7

2.1.1 原材料 7

2.1.2 试剂 7

2.1.3 仪器设备 7

2.2 实验方法 8

2.2.1 原材料含水量的测定 8

2.2.2 天然多肽的提取 8

2.2.3 水解多肽的提取 9

2.3 地龙提取物中多肽含量的测定 12

2.3.1 检测原理 12

2.3.2 考马斯亮蓝法 12

2.3.3 结果计算 13

2.4 地龙提取物中氨基酸氮含量的测定 14

2.4.1 检测原理 14

2.4.2 电位滴定法 14

2.4.3 结果计算 14

2.5 地龙提取物中胆碱含量的测定 14

2.5.1 检测原理 14

2.5.2 雷氏盐重量法 15

2.5.3 结果计算 15

3实验结果与讨论 15

3.1 天然多肽的提取结果 15

3.2 提取水解多肽的单因素实验 16

3.2.1 加酶量 17

3.2.2 固液比 18

3.2.3 搅拌时间 19

3.3 提取水解多肽的正交实验 20

结论 22

致谢 23

参考文献 25