固定化酶水解蛋白的初步研究

固定化酶水解大豆蛋白工艺的初步研究

摘要：固定化酶是酶工程的核心，它有利于实现酶的重复使用及产物与酶的分离。大豆蛋白经酶水解后往往产生一种令人难以接受的苦味，许多研究者已研究确认数种低分子疏水性的苦味肽，是其产生苦味的主要原因。在酶催化水解反应中，诸多因素影响着反应的进行，其中以初始pH,温度，海藻酸钠浓度、固定化时间、底物浓度、凝胶珠中酶量与海藻酸钠量比对反应速度影响较大，必须确定适当的参数来满足较快水解的要求。本实验对以海藻酸钠为载体包埋固定化中性蛋白酶水解大豆蛋白进行了比较研究，确定了最佳工艺条件为初始pH8.0，温度40℃，海藻酸钠浓度为3%，底物浓度为14%，凝胶珠中酶量与海藻酸钠量比为1：3，固定化时间为2.5h。

关键词：酶；固定化酶；包埋法；海藻酸钠；植物蛋白

目  录

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英文摘要 Ⅱ

目录 Ⅲ

绪论 1

    1.1大豆蛋白的生理功能 1

    1.2水解大豆蛋白的优点 2

    1.3酶及酶技术 2

    1.4 固定化方法 3

       1.4.1 吸附法 3

       1.4.2 结合法 3

       1.4.3 交联法 4

       1.4.4包埋法 4

       1.4.5 热固定化法 5

2. 实验部分 6

    2.1材料 6

    2.2 主要设备 6

    2.3实验步骤 6

        2.3.1 大豆分离蛋白的预处理 6

        2.3.2 调节pH 6

        2.3.3 NaOH标准溶液的配制 6

        2.3.4 选择合适的固定化法 7

        2.3.5 游离氨基氮的计算 7

3. 实验结果与讨论 8

    3.1 不同海藻酸钠浓度对水解效果的影响 8

    3.2 固定化的时间对水解效果的影响 9

    3.3 不同浓度的蛋白液对水解效果的影响 10

    3.4 不同酶量与海藻酸钠量比例对水解效果的影响 10

    3.5 初始pH对水解效果的影响 11

    3.6 温度对水解效果的影响 11

    3.7 讨论 12

4. 总结与展望 13

    4.1 总结 13

    4.2 展望 13

致谢 15

参考文献 16