莲子心提取物的抗氧化活性研究
摘 要:本文对莲子心进行了研究,并优化了抗氧化模型。首先建立了检测Fenton反应产生羟基自由的方法。在pH=3.5条件下,羟自由基与甲基紫作用后使甲基紫褪色,在580nm处测定其吸光度值的变化,可间接测定羟自由基的产生量,从而评价药物的抗羟基自由基的活性大小。在最佳实验条件下,当莲子心粗多糖的浓度为20mg/mL时,清除率为48.83%。在莲子心的乙醇与丙酮提取物的实验中,清除率分别为91.36%,78.06%。并建立了邻苯三酚自氧化模型。邻苯三酚在pH=8.2条件下自氧化,释放出O2·-,生成有色中间产物,当清除剂存在时,可清除O2·-,阻止中间产物的积累,溶液在320nm处吸收减弱。当莲子心粗多糖的浓度为25mg/mL时,清除率为22.98%。在莲子心的乙醇与丙酮提取物的实验中,清除率分别为22.80%,44.86%。在DPPH模型中,当莲子心提取物浓度为10mg/mL时,清除率为30.00%。通过本实验可知,莲子心提取物具有一定的抗氧化能力,从而为天然抗氧化试剂的筛选,提供了一定的研究基础。
关键词:莲子心提取物;抗氧化;Fenton反应;邻苯三酚;DPPH
目 录
中文摘要...................................................................Ⅰ
英文摘要...................................................................Ⅱ
目录.......................................................................Ⅲ
1. 绪论.....................................................................1
1.1 自由基方面的研究概况.................................................1
1.2 自由基的检测方法.....................................................3
1.2.1 检测清除O2·-作用的方法...........................................3
1.2.2 检测清除·OH作用的方法...........................................4
1.3 莲子心的研究概况.....................................................4
1.3.1 莲子心的成分.....................................................4
1.3.2 莲子心的药理作用.................................................5
1.3.3 莲子心的开发前景.................................................6
2. 实验部分.................................................................7
2.1 主要仪器.............................................................7
2.2 主要试剂.............................................................7
2.3 溶液配制.............................................................8
2.4 基本原理.............................................................8
2.4.1 羟基自由基·OH实验原理...........................................8
2.4.2 超氧阴离子自由基O2·-实验原理.....................................9
2.4.3 DPPH自由基实验原理.............................................9
2.5 实验方法.............................................................9
2.5.1 检测羟基自由基·OH清除率的实验方法...............................9
2.5.2 检测超氧阴离子自由基O2·-清除率的实验方法........................10
2.5.3 检测DPPH自由基清除率的实验方法................................10
3. 实验结果和分析..........................................................12
3.1 羟基自由基·OH清除率测定实验........................................12
3.1.1 羟基自由基·OH清除率测定条件的选择..............................12
3.1.2 羟基自由基·OH的清除率的测定....................................15
3.2 超氧阴离子自由基O2·-清除率测定实验..................................18
3.2.1 超氧阴离子自由基O2·-清除率测定条件的选择........................18
3.2.2 超氧阴离子自由基O2·-清除率的测定................................20
3.3 DPPH自由基清除率测定实验..........................................23
4. 总结与展望..............................................................24
致谢.......................................................................25
参考文献...................................................................26