萎缩芽孢杆菌（Bacillus aterophaeus）芽孢生成率的研究

萎缩芽孢杆菌（Bacillus  atrophaeus）芽孢生成率的研究

摘要：用萎缩芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus）的芽孢来作为生物指标，以此来检测灭菌仪器的灭菌效果。国内外大多采用固体和液体培养法，本实验采用半固体培养基滤膜法来培养萎缩芽孢杆菌及其芽孢。这种方法既保持固体和液体培养法的优势又克服了它们的不足，同时提高萎缩芽孢杆菌芽孢形成率及细菌总数和芽孢数量,研究了营养条件对其芽孢产率的影响。结果表明：芽孢形成的最适培养基组成为（g/L）：葡萄糖10g、酵母浸膏10g、NaC1 5g、MnSO4·H2O 0.6g；最适pH值为7.0。在上述条件培养下30℃恒温培养24h后，芽孢数量最高可达到 6.03×108mcfu／ml,芽孢形成率可达到82.59％。

关键词：萎缩芽孢杆菌  半固体培养  滤膜培养  芽孢形成率  

目  录

中文摘要 I

英文摘要 II

目录 III

1. 绪论 1

1.1  萎缩芽孢杆菌的介绍 1

1.2  影响芽孢形成率的因素 1

     1.2.1  碳源 1

     1.2.2  氮源 2

     1.2.3  锰离子浓度 2

     1.2.4  无机盐 3

     1.2.5  pH值 3

     1.2.6  不同培养基实验 3

1.3  研究芽孢形成率的方法 3

     1.3.1  固体培养基 3

     1.3.2  液体培养基 4

     1.3.3  半固体培养基滤膜法 4

1.3  本研究的意义 4

2. 材料与方法 5

2.1  菌种与培养基 5

2.1.1  菌种 5

2.1.2  半固体培养基 5

2.1.3  活菌及芽孢检测用培养基 5

2.2  菌种的分离纯化 5

2.3  各种营养因子和培养条件的设计 6

    2.3.1  碳源 6

    2.3.2  氮源 6

    2.3.3  锰离子浓度 6

    2.3.4  无机盐 6

    2.3.5  初始pH值 6

    2.3.6  不同培养基实验 7

2.4  菌种的培养与测定方法 7

    2.4.1  菌种活化 7

         2.4.2  接种 8

         2.4.3  培养24小时 8

         2.4.4  稀释 9

         2.4.5  培养24小时 9

3. 结果与分析 9

3.1  不同碳源对芽孢产率的影响 9

3.2  不同氮源对芽孢产率的影响 10

3.2.1  无机氮源对芽孢产率的影响 10

         3.2.1  有机氮源对芽孢产率的影响 11

3.3  不同锰离子对芽孢产率的影响 13

3.4  不同无机盐对芽孢产率的影响 14

3.5  不同初始pH值对芽孢产率的影响 15

3.6  不同培养基对芽孢产率的影响 16

4．总结与展望 18

致谢 20

参考文献 21