硫酸软骨素的置备工艺

摘要

硫酸软骨素是一种酸性粘多糖，通常以糖蛋白的形式存在于动物体内。硫酸软骨素是由氨基己糖和葡萄糖醛酸为基本结构单元构成的聚合体，分子量为1×104～5×104D。

论文以牛气管软骨为原料，采用缓冲溶液-酶解-醇沉法，以硫酸软骨素得率为主要指标，研究了溶剂类型和浸提条件等因素对硫酸软骨素提取效果的影响。结果显示，采用磷酸氢二钠缓冲溶液作为浸提液、料液比为1:12（w/v）、浸提温度为40℃、浸提时间为36h，醇沉体系的乙醇浓度为70％（v/v）、室温静置1h后离心（500r·min-1）5min，按以上方法和条件得到的硫酸软骨素提取物中，硫酸软骨素含量可达61％（w/w），硫酸软骨素得率为21.5％（w/w）。

论文研究了乙醇沉淀法纯化硫酸软骨素的效果。结果显示当硫酸软骨素粗提物溶液的固形物浓度为18％（w/v）、NaCl浓度为3％（w/v）、pH为6.4、醇沉体系的乙醇浓度为70％（v/v），重复沉淀4次时，硫酸软骨素含量可达93.23％（w/w），较之原粗提物（硫酸软骨素含量为61％，w/w）中的硫酸软骨素含量提高了52.83%，硫酸软骨素得率为45.00％（w/w）。

关键词：硫酸软骨素，提取，纯化

目录

1.文献综述 4

1.1硫酸软骨素的介绍 4

1.1.1硫酸软骨素的分子结构 4

1.1.2硫酸软骨素的理化性质 4

1.1.3硫酸软骨素的药理作用 5

1.2硫酸软骨素的市场现状与发展前景 6

1.2.1中国生化原料的现状 6

1.2.2硫酸软骨素的生产现状和市场前景 7

1.3硫酸软骨素的制备方法 7

1.3.1稀碱浓盐提取方法 7

1.3.2稀碱-酶解提取方法 8

1.4硫酸软骨素的含量测定 9

1.4.1比色法测定硫酸软骨素含量 9

1.4.2咔唑分光光度法 13

1.4.3 中 性 红 法 15

1.5 论文研究的主要内容和意义 17

2．实验部分 17

2.1实验材料与仪器 17

2.1.1实验材料 17

2.1.2实验仪器及器具 18

2.2实验方法 18

2.2.1原料的预处理 18

2.2.2 软骨含水量的测定 18

2.2.3 磷酸氢二钠缓冲溶液的配制 18

2.2.4 浸 提 19

2.2.5 酶 解 19

2.2.6 吸 附 19

2.2.7 沉淀  干燥 19

2.2.8 硫酸软骨素的纯化 19

2.2.9 检测方法 20

2.2.10 正交实验设计 21

2.3结果与讨论 22

2.3.1不同溶液的浸提效果 22

2.3.2 浸提最优条件的确定 23

2.3.3硫酸软骨素的纯化研究 27

3.结论 31

参考文献 32