响应面法优化橘核中柠檬苦素提取分离工艺研究

摘要：为优化柠檬苦素提取工艺，以1g桔核粉提取的柠檬苦素产量为指标，对料液比、超声时间、超声温度、超声功率、提取剂种类及乙醇浓度等因素进行了考察。在单因素实验的基础上，选取超声温度、超声时间和料液比为随机因子，利用响应面法对提取柠檬苦素的工艺进行优化，根据中心组合设计原理采用三因素三水平的响应面分析法，依据回归分析确定最优提取工艺条件。结果表明，柠檬苦素提取的最佳工艺条件为：超声温度为45.65℃，超声时间为17.77min，料液比为1：65.52。采用该工艺条件，1g桔核粉柠檬苦素类似物总产量可达到44.17mg。验证实验值为46.40mg，与理论值相对误差为4.8%。

关键词：柠檬苦素；超声；提取；响应面分析法；工艺优化

目  录

中文摘要 I

英文摘要 II

目  录 III

1  绪论 1

1.1  柠檬苦素的来源 1

1.2  柠檬苦素类似物及其配糖体的结构 1

1.3  柠檬苦素类似物的理化性质 2

1.4  柠檬苦素类似物的分布、含量及生物转化过程 2

1.4.1  柠檬苦素类似物植物体内的分布及各部位的含量 2

1.4.2  柠檬苦素类似物在植物体内的生物转化过程 3

1.5  柠檬苦素类似物的生物活性功能 4

1.5.1  抗癌功能 4

1.5.2  镇痛、消炎功能 4

1.5.3  催眠、抗焦虑作用 4

1.5.4  防止动脉粥样化形成的功能 4

1.5.5  其他作用 5

1.6  柠檬苦素类似物的提取技术 5

1.6.1  丙酮提取-结晶分离法 5

1.6.2  热水提取-树脂吸附法（提取配糖体） 5

1.6.3丙酮提取-甲醇分离-树脂吸附法 5

1.6.4  超临界CO2提取法 5

1.6.5  超声波提取-结晶分离法 6

1.7  柠檬苦素类似物的分离纯化技术 6

1.8  苦素类似物的检测技术 6

1.8.1  光谱分析法 6

1.8.2  高效液相色谱法（HPLC） 7

1.8.3  毛细管电泳法 7

1.8.4  色谱-质谱联用技术 8

1.8.5  免疫技术 8

1.9  柠檬苦素的应用 8

1.9.1  作为化学分类学上的特征化合物 8

1.9.2  作为生物农药制剂 9

1.9.3  在食品中的应用 9

1.10  柠檬苦素的发展前景 9

2  实验部分 11

2.1  实验原料、试剂与仪器 11

2.1.1  原料 11

2.1.2  主要试剂 11

2.1.3  主要仪器 11

2.2  实验步骤 12

2.2.1  柠檬苦素-Ehrlich试剂标准曲线的绘制 12

2.2.2  柠檬苦素的提取 13

2.2.3  响应面设计 13

3  结果与讨论 14

3.1  单因素实验结果与分析 14

3.1.1  提取剂对实验结果的影响 14

3.1.2  超声时间对实验结果的影响 14

3.1.3  乙醇浓度对实验结果的影响 15

3.1.4  超声功率对实验结果的影响 16

3.1.5  料液比对实验结果的影响 16

3.1.6  超声温度对实验结果的影响 17

3.2  响应面法确立最佳工艺条件 18

3.2.1  响应值结果及其拟合模型 18

3.2.2  等高线图和响应面图分析 21

3.3  验证实验 25

3.4  柠檬苦素的分离纯化 25

3.4.1 柠檬苦素分离、纯化工艺流程 25

3.4.2 傅里叶红外光谱鉴定结果 26

4 总结与展望 27

4.1  总结 27

4.2  展望 27

致谢 28

参考文献: 29