不同力电刺激对MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶基因表达的影响，附任务书，开题报告，外文翻译，答辩PPT
摘 要
成骨细胞在体内受到多种因素的影响，如力学环境、电场、磁场以及生化因素等，骨组织的形成过程中前成骨细胞的骨向分化是重要的生理过程，而骨向分化过程伴随着各种物理化学信号对细胞的刺激，其中牵张刺激和电刺激对前成骨细胞的增殖与分化分别具有一定的作用。同时加载牵张电刺激能够更加真实地模拟体内细胞生长的微环境，有利于促进成骨细胞的体外培养以及骨组织的体外培育。
本实验建立在这两种不同刺激的效应之上，通过使用自行设计的牵张、电刺激加载装置，比较分别加载牵张、电刺激以及同时加载两种刺激对于前成骨细胞MC3T3-E1分化的影响。牵张力和电刺激以及力电同时刺激实验均通过RT-PCR法检测成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）基因表达情况。
结果表明牵张力刺激会抑制成骨细胞的碱性磷酸酶（ALP）基因的表达，即抑制成骨细胞的分化；电刺激对成骨细胞的碱性磷酸酶基因的表达没有显著性作用。
力电刺激方式为体外细胞培养、生物反应器的设计、骨疾病的治疗及组织培育提供了新的思路，对组织工程的进一步发展具有重要的研究意义。
关键词：成骨细胞，牵张力刺激，电刺激，ALP基因表达，分化
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.1.1 力刺激对成骨细胞的影响 2
1.1.2 电刺激对成骨细胞的影响 3
1.1.3 电刺激形式 3
1.1.4 电刺激对成骨细胞的生物学效应 4
1.1.5 电刺激促进成骨的作用机制 5
1.1.6 电刺激在骨组织工程中的应用 6
1.2 课题研究意义 7
2 实验目的 9
2.1 研究内容 9
3 实验材料 10
3.1 主要设备 10
3.2 主要试剂 11
3.3 主要试剂配制 11
4 实验方法 12
4.1 细胞培养 12
4.1.1 细胞复苏 12
4.1.2 细胞传代 12
4.2 牵张力与电刺激加载 12
4.2.1 牵张刺激加载实验 12
4.2.2 电刺激加载实验 13
4.2.3 牵张电联合刺激加载实验 13
4.3 RT-PCR方法检测碱性磷酸酶mRNA的表达 13
4.3.1 提取胞内总RNA 13
4.3.2 逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR） 14
4.3.3 凝胶配置方法 15
5 数据处理 16
5.1 RT-PCR图片处理 16
6 结果及分析 18
6.1 结果 18
6.2 讨论 19
6.2.1 牵张力刺激实验 19
6.2.2 脉冲电刺激实验 20
6.2.3 与其他研究的区别 20
结论 22
致谢 23
参考文献 24
