基于兔耳窗实验研究拉伸载荷对血管新生的影响

摘    要

大量的文献报道并证实了力学载荷对新生血管形成的重要影响。这些研究中大部份集中在血管内血流产生的剪切应力对新生血管形成的影响，而血管周围力学载荷对新生血管形成的研究相对较少。在传统的兔耳窗新生血管形成过程中，几乎可近似地认为血管仅受到血管内的血流动力学作用，受到外部组织的整体力学载荷为零。为了研究力学载荷对新生血管的影响，本课题基于兔耳窗技术，设计加工出一种新型兔耳窗装置植入兔耳，获取施加拉伸载荷力学环境下血管新生的图像，初步分析拉伸载荷对新生血管的影响。

本文根据盖片材料的不同将兔耳窗分为三组，分别是云母盖片、硅胶盖片、拉伸硅胶盖片。不同兔耳窗按照相同的手术操作植入兔耳内。在手术后的第3、7、10、13、15天分别进行活体显微镜观察，拍摄血管图像进行图像处理分析。

通过实验，我们在本实验室建立了一套基于兔耳窗技术研究新生血管的实验方法。我们也初步尝试了施加拉伸载荷研究新生血管的实验。同时我们还探索了新生血管的定量分析方法，用血管相对面积来定量分析新生血管。

最后我们得到了一些结果：1）云母盖片组的血管新生要早于硅胶盖片组和拉伸硅胶盖片组，但在第7天三组均有新生血管出现；2）在兔耳窗组织愈合过程中，新生血管形成是一个初期增多，晚期减少的过程，在第7、10、13、15天，血管相对面积无显著性差异。

关键词：兔耳窗、拉伸载荷、血管新生

目       录

1绪论 1

1.1新生血管及其形成 1

1.2影响血管新生的因素 2

1.2.1血管内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells，EPC) 2

1.2.2成纤维细胞生长因子(Fibroblast growth factor，FGF) 3

1.2.3血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF) 3

1.2.4血小板衍生性生长因子(Platelet derived growth factor，PDGF) 3

1.2.5一氧化氮(Nitrogen monoxidum，NO) 3

1.2.6血管生成素(Angiopoietin，Ang) 3

1.2.7力学载荷(Mechanical load，ML) 4

1.3力学环境对新生血管的影响 4

1.4新生血管形成的研究方法 6

1.4本文的立题思路和研究意义 8

1.4.1立题思路 8

1.4.2研究意义 9

1.4.3研究思路 9

2兔耳窗的设计及植入实验 11

2.1兔耳窗的设计 11

2.2兔耳窗的植入实验 12

2.2.1实验分组 12

2.2.2兔耳窗的植入 13

2.3实验后兔子的饲养 16

2.4小结 16

2.5讨论 16

3新生血管图像的采集和分析 18

3.1耳窗的愈合 18

3.2活体显微镜观察 18

3.2新生血管图像的采集 20

3.3新生血管图像的分析 22

3.3小结 23

3.4讨论 24

3.4.1 兔耳窗的改进 24

3.4.1 手术方案的完善 24

3.4.1 图像采集技术 24

3.4.1 图像处理方法的改进 25

3.5 进一步工作展望 25

4结论 26

致谢 27

参考文献 28

附录 33