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文档题目: |
细胞原代培养之鸡胚细胞培养 |
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上传会员: |
pengcheng |
提交日期: |
2014-06-05 13:54:38 |
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文档字数: |
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试验六、细胞原代培养之鸡胚细胞培养
细胞原代培养之鸡胚细胞培养一、本次实验内容
1、鸡胚心肌细胞植块培养
2、鸡皮细胞分离细胞培养
细胞原代培养之鸡胚细胞培养二、实验目的
1、了解细胞体外培养的原理、基本方法;
2、掌握无菌操作方法及注意事项;
3、学习观察体外培养细胞的形态及生长状况。
细胞原代培养之鸡胚细胞培养三、实验原理和预备知识
(一)实验原理
模仿体内生长环境,使来自机体的细胞、组织、器官能够在人工培养条件下生存、生长、繁殖。
(二)预备知识
1、原代培养(primary culture)定义
原代细胞培养是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,经体外培养后,直到第一次传代为止(中途不分割培养物、不更换培养物的生长器皿)。
2、细胞的生长条件:
1)严格无菌环境;
2)适宜温度:36.5℃±0.5℃;
3)渗透压:需等渗溶液;
4)适宜酸碱度:7.2-7.4 ,细胞耐酸性比耐碱性大一些,在偏酸环境中更利于细胞生长。适宜的PH主要是靠恒定的二氧化碳和培养液中的缓冲体系来维持的。
5、气体:95%空气加5%二氧化碳
6、培养基:提供水、无机盐、营养及生长调节因子
(1)合成培养基 (2)天然培养基:如血清(5-20%)
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