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文档题目: |
过氧化物酶活性的测定 |
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上传会员: |
pengcheng |
提交日期: |
2014-06-01 11:16:22 |
文档分类: |
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过氧化物酶活性的测定 (需要:5 积分) 如何获取积分? |
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文档字数: |
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字数:19841
Ⅰ、预实验
ⅰ、过氧化物酶活性的测定
1、实验目的
1.1、通过从马铃薯外皮中提取过氧化物酶,掌握酶活性的测定方法和原理。
1.2、学习使用分光光度计测定酶的活性。
2、实验原理
过氧化物酶是一种含铁卟啉的氧化酶。是利用H2O2将代谢中一些化合物氧化,其活性与呼吸作用和其一些生理过程有关。测定过氧化物酶的活性变化是植物生理和病理上一个常用的指标。
过氧化物酶能催化过氧化氢对某些物质的氧化,如催化过氧化氢氧化愈伤木酚作为被氧化的基质,呈现的棕色可在OD470检测。
3、实验材料、设备及试剂
3.1、实验材料:马铃薯(外皮)
3.2、仪器及设备:
容量瓶(25ml)、量筒(25ml)、移液管(1ml)、研钵、试管架。
72型分光光度计,电子天平,秒表。
3.3、试剂:
0.2M磷酸缓冲液(PH6.0): 将0.2M NaH2PO4 溶液87.7ml与0.2M Na2HPO4溶液12.3ml混合,蒸馏水稀释至200ml。
反应混和液: 0.2M磷酸缓冲液(PH6.0)100ml,加入愈伤木酚0.019ml,开始实验前再加入30% H2O20.02ml,摇匀。
4、实验步骤
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