脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件研究

摘    要

脂肪酶可以用于促进甘油三酯降解为甘油二酯、甘油以及脂肪酸，还可以用于酯的合成、酯的交换等等，因此作为重要的工业酶在食品、药学、日化等工业上应用很广，近年来对脂肪酶的研究也越来越热。本研究从江西理工大学学校食堂地沟边采集土样进行3次富集培养，再使用溴甲酚紫平板法进行分离和筛选具有高酶活的菌株，并利用斜面培养和菌种保藏。从斜面培养基挑取一定的单菌落进行摇瓶培养，再从培养罐中吸取一定量的菌液进行接种并进行发酵培养。对发酵液进行离心分离上清液，使用对硝基苯酚法测酶活。结果表明：筛选到一株革兰氏阴性细菌，其最大酶活达到3000 U左右。从细胞生长和产酶曲线对比可知，在细胞量达到最大值后酶活才急剧上升，说明此细菌的细胞生长和产酶属非生长偶联型。

关键词：

脂肪酶；溴甲酚紫平板法；菌种分离和筛选；对硝基苯酚法

目    录

第一章    献综述 1

1.1脂肪酶 1

1.2脂肪酶生产菌种的分离和筛选 2

1.3脂肪酶的应用 4

1.4研究内容和意义 6

第二章    实验材料和方法 7

2.1土样采取 7

2.2实验试剂和设备 7

2.3培养基 8

2.4实验方法和原理 8

第三章    产脂肪酶菌的分离和筛选 10

3.1富集培养 10

3.2初筛培养 10

3.3复筛培养 10

3.4产脂肪酶微生物镜检 11

3.5种子斜面培养和菌种保藏 11

3.6发酵培养 11

3.7酶活测定 11

3.8脂肪酶酶活时间扫描图像 12

第四章    实验结果和分析 13

4.1筛选结果 13

4.2产脂肪酶微生物的显微镜检测 14

4.3细胞生长和酶活力曲线 14

4.4时间扫描图像 18

4.5小结和讨论 18

致谢 20

参考文献 21

附    录 23

外文文献 23

文献翻译 29